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2-20
核酸分子雜交爐早期用于性病診斷的重組DNA技術(shù)。基本原理是具有一定同源性的兩條核酸單鏈在一定條件下(適宜的溫度及離子強度等)可按堿基互補原則形成雙鏈，此雜交過程是高度特異的。雜交的雙方是待測核酸及探針。待測核酸序列為性病病原體基因組或質(zhì)粒DNA。探針以放射核素或非放射性核素標記，以利于雜交信號的檢測。所謂雜交(hydridization)指兩個以上的分子因具有相近的化學結(jié)構(gòu)和性質(zhì)而在適宜的條件下形成雜交體(hybrid)，雜交體中的分子不是來自一個二聚體分子。同一個二聚體中的...
1-10
電穿孔效應(yīng)是指在適當高壓脈沖電場作用下，細胞或組織間起相對隔離作用的“屏障”內(nèi)快速形成液態(tài)通道的現(xiàn)象，是電場與具有不同介電常數(shù)而且易變形的物質(zhì)相互作用的結(jié)果。從孔的形成、閥值跨膜電壓、膜損傷、分子運輸、組織穿孔、膜恢復和細胞死亡等方面論述了電穿孔效應(yīng)的產(chǎn)生機理，并對電穿孔效應(yīng)的應(yīng)用進行了總結(jié)，在此基礎(chǔ)上，結(jié)合電穿孔生物效應(yīng)實驗研究和應(yīng)用特點，設(shè)計制作了一臺智能化電穿孔儀，該儀器具有矩形脈沖和電容放電脈沖兩種波形輸出，并且脈沖幅值、脈沖寬度、重復頻率可調(diào)。方波電穿孔儀的應(yīng)用：哺...
12-8
紫外交聯(lián)是一種多用途的紫外輻射系統(tǒng)，主要用于將DNA或RNA交聯(lián)到尼龍膜、硝酸纖維素膜上。交聯(lián)過程僅需25-50秒。傳統(tǒng)的方法是將膜置于真空烘箱中80℃烘烤2小時。與真空烘箱烘焙相比，紫外交聯(lián)儀照射可使雜交信號顯著增加。此外VL系列紫外交聯(lián)儀可用于Northern、Southernblotting、EMSA等膜交聯(lián)，CLIP-seq、iCLIP-seq、PAR-CLIP-seq、pBpa、sulfo-SDA、psoralen等雙分子交聯(lián)以及微生物滅活(例如細菌，真菌，病毒)，...
11-8
電穿孔儀電轉(zhuǎn)杯主要由兩個扁平的電極，一個帶有過濾功能并且散布有直徑大約為100nm納米孔的碳酸脂膜(PC膜)以及一個用來支撐兩個電極的支撐部分組成，在使用新裝置進行生物大分子的轉(zhuǎn)化時，先將需要傳遞的試劑加到底部的鈦電極上，之后立即將帶有膜的支撐部分放置到底部電極之上，接著第二片鈦電極被放到整個裝置的頂部，給兩個電極之間施加電脈沖，使細胞膜上形成納米孔，生物大分子得以進入細胞內(nèi)部。電穿孔儀電轉(zhuǎn)杯為一次性消耗品，實際上維護得好的話可以多次重復使用為提高重復使用壽命，請大家注意：1...
10-19
分子雜交爐廣泛地使用于克隆基因的篩選、酶切圖譜的制作、基因組中特定基因序列的定性、定量檢測和疾病的診斷等方面。既可進行固相雜交或液相雜交，又可進行基因芯片雜交實驗；亦能作酶聯(lián)反應(yīng)孵育器。其基本原理就是應(yīng)用核酸分子的變性和復性的性質(zhì),使來源不同的DNA(或RNA)片段,按堿基互補關(guān)系形成雜交雙鏈分子(heteroduplex)。雜交雙鏈可以在DNA與DNA鏈之間,也可在RNA與DNA鏈之間形成。核酸分子雜交是基因診斷的基本方法之一。它的基本原理是:互補的DNA單鏈能夠在一定條件...
9-7
核酸分子雜交按其作用方式可大致分為固相雜交和液相雜交兩種類型。固相雜交是將參加反應(yīng)的一條核酸鏈先固定于固體基質(zhì)上，一條參加反應(yīng)的核酸鏈游離在溶液中，故也稱為膜上印跡雜交。固體基質(zhì)有硝酸纖維素濾膜，其他如尼龍膜、乳膠顆粒和微孔板等。液相雜交是指參加反應(yīng)的兩條核酸鏈都游離在溶液中，使之形成雜交復合物，不需固定支持物，反應(yīng)束后，用羥基磷灰石法或酶解法將未被雜交的單鏈和雜交鏈分開。核酸分子雜交箱采用滾動式反應(yīng)架裝置，配套特制密封雜交管在水平軸上旋轉(zhuǎn)，使雜交管內(nèi)壁上的雜交反應(yīng)膜各處能均...
8-18
紫外交聯(lián)儀是一個完整的、微處理器控制的紫外線照射系統(tǒng)，主要用于將核酸連接到膜和消除PCR污染。可編程微處理器持續(xù)監(jiān)控紫外光發(fā)射。當輻照的能量與預設(shè)置的能量相匹配時，照射會自動停止。無論紫外線燈管的強度如何波動，輻照能量都可以實現(xiàn)重現(xiàn)。也是一種多用途的254mm紫外輻射系統(tǒng)，主要用于將核酸交聯(lián)于膜上。還可用于瓊脂糖凝膠中DNA的切割、RecA突變篩選、嘧啶二聚體產(chǎn)生的部分限制性內(nèi)切酶消化、UA滅菌消除PCR污染等。在紫外滅菌、聚合物紫外處理等方面也有應(yīng)用價值。紫外交聯(lián)儀特點：①...
7-21
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